HemaBook. Глава 5: Как Mindray выполняет точный подсчет тромбоцитов при их низком содержании

Клиническая значимость

Получаемые из мегакариоцитов, тромбоциты образуются и созревают в костном мозге. Помимо участия в формировании тромбов и заживлении ран, тромбоциты также играют важную роль в воспалении, иммунном ответе, канцерогенезе^[1]. Диапазон нормальных значений тромбоцитов колеблется в пределах от 150 до 400×10⁹/л. Когда количество тромбоцитов становится ниже чем 100×10⁹/л, то говорят о тромбоцитопении^[2].

Существует несколько причин тромбоцитопении, в том числе снижение образования тромбоцитов, повышенное разрушение тромбоцитов, повышенная секвестрация тромбоцитов в селезенке^[3]. В настоящее время клинический анализ крови вместе с анализом мазка крови являются важнейшим диагностическим методом первичной оценки пробы крови с тромбоцитопенией^[2]. Поэтому точный подсчет тромбоцитов при их низком содержании в пробе с помощью автоматического гематологического анализатора может стать эффективным решением, которое позволит значительно реже проводить анализ мазков крови и быстро проводить анализ проб с тромбоцитопенией.

Однако выполнить точный подсчет тромбоцитов при их низком содержании в крови не так просто. Как высокотехнологичный автоматический гематологический анализатор Mindray справляется с этой задачей?

Решение Mindray

Технология 1. Высокоспецифичное флюоресцентное окрашивание

Флюоресцентный краситель был специально разработан для быстрого обнаружения клеток. Флуоресцентная молекула захватывает нуклеиновые кислоты в клетках тромбоцитов, избегая при этом интерференции от микроцитов, фрагментов эритроцитов и лейкоцитов и других мелких частиц. Тромбоцит, окрашенный специальным флуоресцентным красителем, затем проходит через лазерный детектор для оптического анализа. Высокая специфичность и аффинность флуоресцентного красителя обеспечивает достаточно стабильное связывание с РНК. Это гарантирует точный подсчет даже небольшого количества тромбоцитов и отображение результатов на 3D-диаграмме SF CUBE.

Технология 2. Оптическое обнаружение с высоким разрешением

Кроме того, высокотехнологичный гематологический анализатор Mindray сочетает технологию подавления отраженного света с SiPM (кремниевый фотоумножитель), который обладает высокой чувствительностью к флуоресцентному сигналу и одновременно минимизирует фоновые шумы при оптической детекции . Это значительно улучшает предел обнаружения частиц: нижний предел для небольших частиц составляет 1 мкм (диаметр небольших тромбоцитов составляет 2 мкм), что гарантирует то, что на результаты не будут влиять небольшие тромбоциты или частицы.

Технология 3. Дезагрегация тромбоцитов

Псевдотромбоцитопения вызвана агрегацией тромбоцитов in vitro в пробе с антикоагулянтом ЭДТА, что может привести к определению ложнонизкого количества тромбоцитов^[4]. Отдел R&D компании Mindray провел предварительные исследования механизмов активации тромбоцитов, которые в основном регулируются кальциевым каналом, путем тирозинкиназы и GPIIb/IIIa. Затем применяются антагонисты, которые содержатся в разбавителе DR для прямой блокировки сайтов связывания на поверхности тромбоцита, что значительно минимизирует образование конгломератов тромбоцитов. Более подробный механизм дезагрегации тромбоцитов будет опубликован в следующей главе HemaBook.

Рис. 4. Автоматический подсчет 8×PLT-O

Компания Mindray находится в процессе подачи патентной заявки (см. рисунок ниже) на технологию подсчета Auto 8×PLT-O. Сначала значение PLT-I, полученное из канала импеданса, сравнивается со значением по умолчанию (50×10⁹/л). Если это значение меньше предельного значения, анализатор может автоматически продлить время подсчета до 8 раз, чтобы собрать больше фрагментов тромбоцитов для дальнейшего анализа. Кроме того, технология автоматического подсчета 8×PLT-O может устранить другие интерферирующие факторы (например, фрагменты эритроцитов или лейкоцитов), которые канал импеданса легко может ошибочно принять за тромбоциты. Нет необходимости в дополнительном отборе проб, работе руками, дополнительных реагентах: подсчет 8×PLT-O эффективен и результативен, позволяет провести точный подсчет низкого количества тромбоцитов.

Список литературы:

[1] Thrombocytopenia, Eun-Ju Lee, et al, Prim Care Clin Office Pract 43 (2016) 543–557.

[2] Platelet disorders: an overview, M. Krishnegowda, et al, Blood Coagulation and Fibrinolysis, 2015, Vol 26 No 5.

[3] Thrombocytopenia: an update, K. J. Smock, et al, Int. Jnl. Lab. Hem. 2014, 36, 269–278.

[4] Pseudothrombocytopenia, M Blonska, et al, Wiad Lek. 2001;54(5-6):333-6.