HemaBook - Capítulo 2: Mais uma opção para resolver EDTA-PTCP?

Mindray 2020-09-16

A Pseudotrombocitopenia dependente de Ácido etilenodiaminotetracético (EDTA-PTCP) é um artefato laboratorial que pode levar a uma avaliação incorreta e ao tratamento desnecessário dos pacientes.

Quais dos seguintes métodos você usaria para corrigir a contagem de plaquetas em caso de agregação plaquetária induzida por EDTA na trombocitopenia?

Verificação do esfregaço sanguíneo e contagem de plaquetas
Verificação com adição de amicacina
Verificação após o aquecimento a 37 °C
Verificação sem adição de anticoagulante
Repetição em outro dispositivo de hematologia
Verificação com outros anticoagulantes

Médicos profissionais de laboratório clínico buscam precisão e verdade com o mais alto senso de responsabilidade. Atualmente, alguns estudos clínicos foram conduzidos para explorar soluções de EDTA-PTCP e sugerem que os sistemas de hematologia da Mindray com a tecnologia SF Cube seriam uma opção para auxiliar os técnicos de laboratório na contagem correta de plaquetas.

Caso clínico

Esta paciente é uma mulher de 32 anos com infertilidade. Depois que o sangue anticoagulado com EDTA da paciente foi coletado, a amostra foi analisada em cinquenta e cinco minutos e mostrou uma baixa contagem de plaquetas (28 × 10⁹/L). O teste foi feito pelo método de impedância (PLT-I) em um sistema de hematologia de marca popular (dispositivo A). A agregação plaquetária foi confirmada por exame microscópico do esfregaço, indicando pseudotrombocitopenia (PTCP). Pouco depois, um re-exame desta amostra foi feito usando o método CDR (PLT-O) no equipamento da Mindray BC-6800Plus. Os resultados mostraram uma contagem de plaquetas evidentemente maior com um valor de 180 × 10⁹/L.

Suspeitou-se que a baixa contagem de plaquetas obtida pelo dispositivo A foi devido ao PTCP induzido por EDTA. Assim, foi solicitado a paciente seu consentimento para um teste adicional usando um tubo de amostra de sangue com citrato de sódio desta vez. A análise foi realizada trinta minutos após a coleta da amostra. Os parâmetros de plaquetas resultantes das amostras de sangue executados por meio de vários métodos de teste e dispositivos estão listados na Tabela 1.

Comparação adicional de outras amostras

Sob avaliação microscópica do esfregaço de sangue anticoagulado com EDTAa agregação plaquetária foi encontrada, enquanto no sangue anticoagulado com citrato de sódio o mesmo não foi identificado. As amostras de sangue foram analisadas em até quatro horas a partir do momento da coleta, de acordo com as instruções do fabricante. Além desse paciente, foram coletados e avaliados os dados de mais cinco casos de EDTA-PTCP (Tabela 2).

No final, o autor conclui: Em pacientes com EDTA-PTCP conhecida ou suspeita, a tecnologia Mindray SF-Cube é uma maneira direta e eficaz de determinar a contagem de plaquetas no sangue anticoagulado com EDTA.

Identificação e características das amostras de EDTA-PTCP

As amostras que acionaram o flag “agregação PLT” no analisador de hematologia mostraram uma irregularidade serrilhada típica e uma cauda em zigue-zague (Figura 1) no histograma de plaquetas. Além disso, na avaliação microscópica, a presença de satelitismo plaquetário, ou plaquetas gigantes, não foi observada.

Figura 1: Histograma de plaquetas típico e imagens microscópicas de amostras de EDTA-PTCP. EDTA-PTCP, pseudotrombocitopenia dependente do ácido etilenodiaminotetracético.

Baixas contagens de plaquetas espúrias no BC-6800 por contagem óptica de plaquetas (PLT-O)

Vinte e três amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA (com agregação plaquetária) foram testadas na impedância (PLT-I (EDTA)) e no canal de reticulócitos do Mindray BC-6800 (PLT-O (EDTA)). Curiosamente, os resultados do PLT-O (EDTA) foram comparáveis às contagens de plaquetas das amostras recoletadas em tubos de citrato (PLT-I (Citrato)), o que prova que o método PLT-O (EDTA) pode ajustar a contagem plaquetária causada pelo EDTA com precisão (Figura 2).

Figura 2: As contagens de plaquetas de fluorescência óptica no BC-6800 de amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA foram comparadas com as contagens de impedância de plaquetas de amostras de EDTA-PTCP em tubos de citrato. PLT-I (EDTA), contagens de impedância de plaquetas de amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA; PLT-O (EDTA), contagem de plaquetas de fluorescência óptica de amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA; PLT-I (citrato), contagens de impedância de plaquetas de amostras de EDTA-PTCP em tubos de citrato; EDTA-PTCP, pseudotrombocitopenia dependente do ácido etilenodiaminotetracético.

Efeito de dissociação EDTA-PTCP do sistema de hematologia de uma marca principal:Disponível com coloração fluorescente?

A contagem óptica de plaquetas por fluorescência está disponível em analisadores hematológicos de última geração (dispositivo B) e nos analisadores hematológicos Mindray BC-6000. Neste método, um corante fluorescente é usado para tingir os ácidos nucleicos nas plaquetas, permitindo o reconhecimento de plaquetas grandes e excluindo partículas não plaquetárias, como restos de eritrócitos, micro eritrócitos ou fragmentos de leucócitos.

Figura 3: Nenhum efeito de dissociação da contagem de plaquetas de fuorescência óptica no dispositivo B em pacientes com EDTA-PTCP. PLT-I (EDTA), contagens de impedância de plaquetas de amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA; PLT-O (EDTA), contagem de plaquetas de fluorescência óptica de amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA; PLT-I (citrato), contagens de impedância de plaquetas de amostras de EDTA-PTCP em tubos de citrato; EDTA-PTCP, pseudotrombocitopenia dependente do ácido etilenodiaminotetracético.

Para verificar se o efeito de dissociação da contagem de plaquetas de fluorescência óptica era dependente da coloração com corante fluorescente, 17 daquelas 23 amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA também foram testadas no canal de reticulócito e canal de impedância do dispositivo B. Nenhuma diferença significante foi observada entre a contagem de plaquetas do canal de reticulócitos e do canal de impedância (Figura 3). Apenas uma das 17 amostras de EDTA-PTCP mostrou uma taxa de dissociação de mais de 80%, com uma taxa de dissociação média de 56% entre todas as 17 amostras de EDTA-PTCP (Figura 3).

Conclusão

Em resumo, o autor conclui: A contagem de plaquetas por fluorescência óptica do analisador de hematologia BC-6800 é eficaz para a correção de contagens baixas de plaquetas espúrias em pacientes com EDTA-PTCP e seu efeito de dissociação em amostras de EDTA-PTCP é independente da coloração com corante fluorescente.

No intenso trabalho diário do laboratório, o PTCP é um problema inevitável. A tecnologia Mindray SF Cube fornece a mediçã de PLT-O (com base na coloração fluorescente de ácido nucleico e feito no canal RET) para corrigir contagens de PLT quando há redução de pseudoplaquetas devido ao EDTA. O PLT-O está disponível no Analisador de hematologia automática Mindray BC-6000 Series e na linha de análise celular CAL 8000/6000.

Referências:

[1] J. Deng, et al. Tecnologia Mindray SF-Cube: Uma maneira eficaz de corrigir a contagem de plaquetas em indivíduos com pseudo trombocitopenia dependente de EDTA. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99–101

[2] Y. Bao, et al. Correção de contagens de plaquetas baixas espúrias por contagem de plaquetas de fluorescência óptica do analisador de hematologia BC-6800 em pacientes com pseudo trombocitopenia dependentes de EDTA. Transl Cancer Res 2020; 9 (1): 166-172