HemaBook Capítulo 5: Como a Mindray conta as baixas plaquetas corretamente

Importância clínica

Derivadas dos megacariócitos, as plaquetas (PLT) são produzidas e maturadas na medula óssea. Além da trombose amplamente conhecida e do reparo de feridas, o PLT também desempenha papéis importantes na inflamação, imunidade e biologia do câncer^[1]. Os intervalos de referência normais de PLT no sangue periférico variam na faixa de 150-400×10⁹/L. Quando o valor de PLT é inferior a 100×10⁹/L, um problema clínico comum identificado como trombocitopenia (baixo PLT) pode ser o resultado^[2].

Existem várias causas de trombocitopenia, incluindo diminuição na produção de PLT, aumento da destruição de PLT, aumento do sequestro e diluição esplênicos^[3]. Atualmente, o hemograma completo (CBC) e as análises por esfregaço sanguíneo são métodos diagnósticos essenciais para a avaliação inicial de amostras com trombocitopenia^[2]. Portanto, a contagem correta de PLT baixo por um analisador de hematologia automática pode ser uma abordagem prospectiva que reduzirá muito a taxa de esfregaço sanguíneo e economizará tempo trabalhoso no laboratório de diagnóstico, rastreando rapidamente as amostras com trombocitopenia.

No entanto, a contagem correta de PLT baixo não é um processo simples. Como o analisador hematológico automático de última geração da Mindray lida com amostras de PLT baixo?

Solução da Mindray

Tech 1. Coloração fluorescente altamente específica

O corante fluorescente (corante FR) foi especialmente desenvolvido com a capacidade de identificar células-alvo imediatamente. Em seguida, a molécula fluorescente captura o ácido nucléico nas células PLT, evitando interferências de pequenos RBCs, fragmentos de RBC/WBC e outras partículas pequenas. PLT com corante fluorescente específico passa posteriormente pelo detector a laser para medição óptica. A alta especificidade e afinidade do corante fluorescente garante que a ligação dentro das células PLT seja estável o suficiente para que as células atravessem o laser. Isso garante que mesmo pequenas quantidades de PLT possam ser mapeadas e contadas no diagrama de dispersão SF CUBE 3D com precisão.

Tech 2. Detecção óptica de alta resolução

Além disso, o analisador de hematologia de ponta da Mindray combina tecnologia de supressão de luz reflexiva com SiPM (fotomultiplicador de silício), que é altamente sensível a sinais de fluorescência, minimizando simultaneamente o ruído de fundo durante a detecção óptica. Isso melhora muito o limite de detecção de partículas e o limite inferior para pequenas partículas que atingem até 1 um (diâmetro de 2 um é definido como PLT pequeno), garantindo que os resultados da amostra não sejam interferidos por pequenos PLT ou partículas.

Tech 3. Desagregação Plaquetária

A pseudotrombocitopenia é causada pelo acúmulo de plaquetas em um tubo de sangue com EDTA, o que pode levar a uma contagem de PLT falsamente baixa^[4]. O departamento de R&D da Mindray conduziu estudos preliminares com foco nos mecanismos de ativação do PLT, que é regulado principalmente pelo canal de cálcio, via da tirosina quinase e GPIIb/IIIa. E então os antagonistas são aplicados em diluente DR para bloquear diretamente os locais de ligação na superfície de PLT, o que minimiza muito a formação de agregados de PLT. Um mecanismo de desagregação PLT mais detalhado será lançado no próximo capítulo do HemaBook.

Figura 4. Contagem automática 8×PLT-O

A Mindray está em processo de pedido de patente (veja a imagem abaixo) para a tecnologia de contagem Auto 8 × PLT-O. Para começar, o valor PLT-I obtido do canal de impedância é primeiro comparado com um valor padrão (50×10⁹/L). Se for inferior ao valor de corte, o analisador pode prolongar automaticamente o tempo de contagem em até oito vezes para coletar mais partículas PLT para análise posterior. Além disso, a tecnologia de contagem automática 8 × PLT-O pode eliminar outros fatores de interferência (por exemplo, RBC/WBC fragmentados) que muitas vezes são contados erroneamente como PLT pelo canal de impedância. Sem amostragem adicional, sem intervenção manual, sem canais e reagentes adicionais necessários - a contagem de 8 × PLT-O é eficiente e eficaz na contagem correta de PLT baixo.

Referências:

[1] Thrombocytopenia, Eun-Ju Lee, et al, Prim Care Clin Office Pract 43 (2016) 543–557.
[2] Platelet disorders: an overview, M. Krishnegowda, et al, Blood Coagulation and Fibrinolysis, 2015, Vol 26 No 5.
[3] Thrombocytopenia: an update, K. J. Smock, et al, Int. Jnl. Lab. Hem. 2014, 36, 269–278.
[4] Pseudothrombocytopenia, M Blonska, et al, Wiad Lek. 2001;54(5-6):333-6.