BC-6800Plus: Rzetelne narzędzie do badań przesiewowych w kierunku malarii wywoływanej przez P. vivax

Epidemiologia malarii

Malaria jest chorobą wywoływaną przez zarodźce Plasmodium i zagrażającą życiu. W 2019 roku prawie połowa populacji świata była narażona na zachorowanie na malarię. Odnotowano 229 milionów nowych zakażeń, a 409 000 osób zmarło. Większość przypadków i zgonów stwierdzono w Afryce Subsaharyjskiej^[1]

Rysunek 2. Kraje z przypadkami rodzimego zakażenia w 2000 r. i ich status do 2018 r.

Wczesna diagnostyka malarii

• Wczesne rozpoznawanie zmniejsza negatywne skutki przebiegu choroby, zakażenia i śmiertelność wywołane malarią.
• Wszelkie przypadki podejrzenia malarii powinny być potwierdzone przy pomocy badania mikroskopowego krwi lub szybkiego testu diagnostycznego (ang. rapid diagnostic test, RDT).
  

1. Badanie Mikroskopowe

Wykrywanie pasożytów malarii pod mikroskopem w cienkim i grubym rozmazie krwi to wiarygodna metoda diagnostyczna, pozwalająca na ocenę ilościową i identyfikację gatunku zarodźca. Mikroskopia jest metodą referencyjną w diagnostyce malarii i jest powszechnie stosowana ze względu na jej niski koszt. Do jej wad należą jednak:

• Subiektywność: postawienie prawidłowej diagnozy zależy od umiejętności osoby wykonującej badanie.
• Czasochłonność: przy diagnostyce malarii diagnosta musi ocenić co najmniej 100 pól.
• Trudno zapewnić jednolitą jakość preparatów ze względu na zmienność badania mikroskopowego, jakości barwienia i rozmazu.
  

2. RDT

RDT to test immunochromatograficzny służący do wykrywania specyficznych dla pasożytów antygenów we krwi. Wynik testu jest dostępny szybko i w mniejszym stopniu jest zależny od wykwalifikowanego personelu. Wady tej metody:

• Różne właściwości antygenów mogą mieć wpływ na możliwość ich zastosowania w różnych sytuacjach.
• Brak informacji o ilości pasożytów.
• Produkty handlowe o niejednorodnej jakości i różnice między poszczególnymi partiami.
  

Wykrywanie malarii za pomocą aparatu Mindray BC-6800Plus

Unowocześnienia techniczne automatycznych analizatorów hematologicznych sprawiły, że urządzenia te stały się bardzo inteligentne. W kanale różnicującym (DIFF) analizatora Mindray BC-6800Plus, subpopulacje krwinek białych (WBC) i czerwonych (RBC) są różnicowane w zależności od ich wielkości i złożoności (Rysunek 3).

Analizator BC-6800Plus zapewnia dedykowane oznakowanie zakażonych erytrocytów (InR) oraz podaje ich liczbę InR (InR#) / promil InR (InR‰). Funkcje te są dostępne podczas wykonywania pełnej morfologii krwi (CBC), jako narzędzie do badań przesiewowych w kierunku malarii (Rysunek 4).

Skuteczność BC-6800Plus w badaniach przesiewowych w kierunku malarii

Przeprowadzono badanie 30 077 przypadków malarii, w którym badanie cienkich i grubych rozmazów kropli wykonywali doświadczeni diagności, a morfologię krwi wykonywano na analizatorze hematologicznym Mindray BC- 6800Plus. W 285 przypadkach stwierdzono dodatni wynik badania w kierunku malarii wywoływanej przez P. vivax. W badaniu[2] stwierdzono czułość 99,65% i wartość predykcyjną ujemną wynoszącą prawie 100% dla oznakowania InR dla P. vivax, zatem BC-6800Plus może służyć jako doskonałe narzędzie przesiewowe, szczególnie dla malarii wywoływanej przez P. vivax.

• Zakażone krwinki czerwone oparły się lizie i zajmowały określoną strefę jako skupiska kropek w sześcianie 3D (Rysunek 5).
  

• W większości przypadków zakażenia P. vivax, wartość InR# była porównywalna z oceną mikroskopową. Czasami duża liczba wczesnych form pierścieniowych prowadzi do niższego InR# niż w mikroskopii (Rysunek 6).
  

• Prawdziwie pozytywne: porównano kilka parametrów wśród dodatnich przypadków malarii w rozmazie.
  

Przypadki kontrolne: przypadki ujemne w rozmazie, które nie miały znacznika „zakażone RBC”. Przypadki fałszywie pozytywne: przypadki ujemne w rozmazie, które miały znacznik „zakażone RBC”. Stwierdzono istotne różnice w tych parametrach (Różnica WBC, InR#, InR‰) pomiędzy obiema grupami (Tabela 1).

Tabela 1: Porównanie statystyczne niektórych ważnych parametrów w różnych grupach.

NLR=stosunek neutrofili do limfocytów, PLR=stosunek płytek krwi do limfocytów, Różnica WBC=liczba WBC-DIFF minus liczba WBC-WNB, InR#=liczba zakażonych krwinek czerwonych, InR#=wartość procentowa zakażonych krwinek czerwonych (*wskazuje na wysoką istotność statystyczną)

• InR# była porównywalna z różnicą WBC (liczba WBC z kanału DIFF minus liczba WBC z kanału WNB). InR# w niektórych przypadkach jest znacząco wysoka, a różnica WBC niska. W tych przypadkach zakażone krwinki wpływały na klasyfikację WBC. Obserwując korelację między różnicą WBC a InR# stwierdzono nieprawdziwy wynik całkowitej liczby WBC (Rysunek 7).
  

Oznakowanie InR i parametry InR#/ InR‰ dostarczane przez BC-6800Plus mogą być wykorzystywane jako wskaźnik do badań przesiewowych w kierunku malarii. Gdy wynik dla określonego typu nieprawidłowej morfologii krwinek przekroczy ustalony próg, analizator stosuje odpowiednie oznakowanie. Im wyższa jest ustawiona wartość progowa, tym mniejsza jest czułość alarmu. W analizatorze hematologicznym BC-6800Plus można skonfigurować odpowiednie wartości progowe alarmu oznakowania dla badań przesiewowych w kierunku malarii w praktyce klinicznej.

Bibliografia

[1] Światowa Organizacja Zdrowia. World malaria report 2019. Dostępny pod adresem: www.who.int/publications-detail/world-malaria-report-2019. Dostęp: 21 stycznia 2020 r.
[2] Dhanani, H. J. Evaluation of automated hematology analyser: Mindray BC-6800 plus as a screening tool for diagnosing malaria. International Journal of Research in Medical Sciences 8, 1750, doi:10.18203/2320-6012.ijrms20201922 (2020).