BC-6800Plus: Надежное скининговое оборудование для выявления заражения малярией P. vivax

Эпидемиология малярии

Малярия — это опасное для жизни заболевание, вызываемое паразитарными одноклеточными организмами рода Plasmodium. В 2019 году почти половина населения Земли подвергалась риску заражения малярией. Было зарегистрировано 229 миллионов новых случаев заражения и 409 000 летальных случаев. Большинство случаев заболевания и смертей приходится на страны Африки к югу от Сахары^[1]

Рис. 2. Страны, в которых были случаи заболевания среди коренного населения в 2000 году, и их состояние в 2018 году

Ранняя диагностика малярии

• Ранняя диагностика снижает заболеваемость и смертность от малярии.
  
• Все случаи подозрения на малярию должны быть подтверждены с помощью световой микроскопии или быстрого диагностического теста (RDT - rapid diagnostic test).
  

1. Световая микроскопия

Обнаружение малярийных паразитов с помощью световой микроскопии в толстых и тонких мазках является надежным методом диагностики, количественного определения малярийных паразитов и идентификации инфицирующего вида. Световая микроскопия является эталонным методом диагностики малярии и широко используется благодаря своей экономической эффективности. Однако у этого метода есть свои недостатки:

• Субъективность: точность диагностики зависит от компетентности микроскописта.
  
• Требует много времени: микроскопист должен исследовать не менее 100 полей зрения для диагностики малярии.
  
• Трудно обеспечить качество микроскопических препаратов из-за различий в микроскопических исследованиях, в качестве самих мазков и их окрашивания.
  

Быстрый диагностический тест (RDT)

РДТ — это иммунохроматографический тест для выявления специфических антигенов паразитов в крови. Результат теста можно получить довольно быстро, кроме того, он меньше зависит от квалификации персонала. Недостатки этого метода:

• Различные характеристики этих антигенов могут повлиять на возможность их использования в различных ситуациях.
  
• Отсутствие информации о паразитной нагрузке.
  
• Неоднородное качество коммерчески доступных тестов и наличие различий между лотами.
  

Выявление малярии на анализаторе Mindray BC-6800Plus

Модернизация автоматических гематологических анализаторов сделала их высокотехнологичными. В канале для дифференциации (DIFF) Mindray BC-6800Plus RBC (эритроциты) и субпопуляции WBC (лейкоциты) дифференцируются в зависимости от их размеров и сложности строения (рис. 3).

BC-6800 Plus выдает специальный флаг InR (инфицированные эритроциты), определяет количество InR (InR #), количество InR на одну тысячу эритроцитов (InR ‰), которые включены в общий анализ крови в качестве инструмента для скрининга малярии (Рисунок 4).

Эффективность BC-6800Plus для скрининга малярии

Было проведено исследование 30 077 случаев малярии, в ходе которого опытные микроскописты исследовали толстые и тонкие мазки, а общий анализ крови проводился на гематологическом анализаторе Mindray BC- 6800Plus. При исследовании мазков было обнаружено 285 положительных случаев малярии, вызываемой P. vivax. Исследование[2] показало, что чувствительность составляет 99,65%, а NPV (отрицательная прогностическая значимость) почти 100% для флага InR в случае P. Vivax. Таким образом BC-6800Plus может быть прекрасным инструментом для скрининга малярии, вызываемой P. vivax.

• Пораженные эритроциты не подверглись лизису и сосредоточились в одной области в виде кластера точек в 3D-кубе (Рисунок 5).
  

• В большинстве случаев P. vivax параметр InR# был сопоставим с данными микроскопии. Иногда большое количество ранних кольцевых форм приводит к более низкому InR#, чем при микроскопии (Рисунок 6).
  

• Было проведено сравнение нескольких параметров среди случаев малярии с положительным мазком.
  

Контрольные случаи: отрицательные мазки, у которых отсутствовал флаг "инфицированные RBC?" Ложноположительные случаи: отрицательные мазки, у которых присутствовал флаг "инфицированных RBC?" По этим параметрам (Delta WBC, InR#, InR‰) наблюдались значительные различия между двумя группами (Таблица 1).

Таблица 1. Статистическое сравнение некоторых важных параметров между различными группами.

NLR=соотношение нейтрофилов и лимфоцитов, PLR= соотношение тромбоцитов и лимфоцитов , Delta WBC=количество WBC-DIFF минус количество WBC-WNB, InR#=количество инфицированных эритроцитов, InR%=процент инфицированных эритроцитов. (*указывает на статистически высокую значимость)

• InR# сопоставлялся с Delta WBC (количество WBC из канала DIFF минус количество WBC из канала WNB). InR# в некоторых случаях значительно повышен, но показатель delta WBC низкий. В этих случаях InR влияли на дифференциацию WBC. Общее ложное количество WBC было обнаружено путем наблюдения за корреляцией между Delta WBC и InR# (Рис. 7).
  

Флаг InR и параметры InR#/ InR‰, определяемые анализатором BC-6800Plus, можно использовать в качестве индикатора для скрининга малярии. Когда значение для определенного типа аномальной морфологии клеток крови превышает установленный порог, анализатор выдает соответствующий флаг. Чем выше установлено пороговое значение, тем ниже чувствительность сигнала. При проведении скрининга малярии в клинической практике вы можете установить на BC-6800Plus пороговые значения сигнала для соответствующих параметров.

Список литературы

[1] World Health Organization. World Malaria report 2019. Available at: www.who.int/publications-detail/world-malaria-report-2019. Accessed 21 January, 2020.
[2] Dhanani, H. J. Evaluation of automated hematology analyser: Mindray BC-6800 plus as a screening tool for diagnosing malaria. International Journal of Research in Medical Sciences 8, 1750, doi:10.18203/2320-6012.ijrms20201922 (2020).