Новости> Пресс-центр

HemaBook. Глава 2. Еще один вариант решения проблемы ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении?

Mindray 2020-11-13

Псевдотромбоцитопения, индуцированная этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) — это лабораторный артефакт, который может привести к неправильной оценке состояния пациентов и назначению им ненужного лечения.

Какой (какие) из следующих методов следует использовать, чтобы скорректировать количество тромбоцитов в случае тромбоцитопении, вызванной ЭДТА-индуцированной агрегацией тромбоцитов?

Повторно проверить мазок крови и оценить количество тромбоцитов

Повторно проверить с добавлением амикацина

Повторно проверить после нагревания при 37 °C

Сразу же повторно проверить разведение без антикоагулянтов

Повторно проверить на другом гематологическом приборе

Повторно проверить с другими антикоагулянтами

Опытные врачи клинических лабораторий, на которых возлагается повышенная ответственность, всегда стремятся к точности и достоверности результатов. На сегодняшний день были проведены некоторые клинические исследования, нацеленные на поиск решений проблемы ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении. Было установлено, что гематологические системы Mindray с технологией SF Cube идеально подходят для определения количества тромбоцитов в лабораторных условиях.

Отчет о клиническом случае

Пациентка — 32-летняя женщина с бесплодием. После взятия образца ЭДТА-антикоагулированной крови пациентки он был проанализирован через 55 минут, и в результате был выявлен низкий уровень тромбоцитов (28 × 109/L). Тест был проведен импедансным методом (PLT-I) на гематологической системе популярного бренда (устройство А). Агрегация тромбоцитов подтверждена микроскопическим исследованием мазка, что указывает на псевдотромбоцитопению. Вскоре после этого был проведен повторный анализ этого образца методом CDR(PLT-O) с использованием Mindray BC-6800Plus. Результаты показали заметно большее количество тромбоцитов: 180 × 109/L.

Предполагается, что низкое количество тромбоцитов, полученное на устройстве А, связано с ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопенией. Далее пациентку попросили дать согласие на проведение дополнительного теста, на этот раз — с добавлением цитрата натрия в пробирку с образцом крови. Через 30 минут после взятия образец был проанализирован. Полученные параметры тромбоцитов в образцах крови были изучены с использованием разных методов и устройств тестирования, перечисленных в Таблице 1.

Дальнейшее сравнение других образцов

При изучении мазка крови под микроскопом в ЭДТА-антикоагулированной крови была обнаружена агрегация тромбоцитов, а в цитрат-антикоагулированной крови — нет. В соответствии с инструкциями производителя образцы крови анализировались в течение четырех часов с момента сбора. Помимо данных этой пациентки, были собраны и оценены данные еще по пяти случаям ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении (Таблица 2).

По завершении автор делает вывод: для пациентов с установленной ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопенией или с подозрением на нее технология Mindray SF-Cube представляет собой простой и эффективный метод определения количества тромбоцитов в ЭДТА-антикоагулированной крови.

Идентификация и характеристики образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении

Образцы, для которых на гематологическом анализаторе появился значок «Агрегация PLT», продемонстрировали типичную нерегулярность с зазубринами и зигзагообразный хвост (Рис. 1) на гистограмме тромбоцитов. Кроме того, при изучении под микроскопом не обнаружено сателлитизма тромбоцитов или гигантских тромбоцитов.

Рисунок 1. Типичная гистограмма тромбоцитов и микроскопические снимки образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении. Псевдотромбоцитопения, индуцированная этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА).

Ложное низкое количество тромбоцитов в BC-6800, подсчитанное оптическим методом (PLT-O)

23 образца ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении в пробирках ЭДТА (с агрегацией тромбоцитов) были протестированы в импедансном (PLT-I (ЭДТА)) и ретикулоцитарном канале Mindray BC-6800 (PLT-O (ЭДТА)). Интересно то, что результаты PLT-O (ЭДТА) были сопоставимы с количеством тромбоцитов для повторно отобранных образцов в цитратных трубках (PLT-I (Citrate)), что доказывает, что метод PLT-O (ЭДТА) может быть с точностью адаптирован к проблеме агрегации тромбоцитов, вызванной ЭДТА (Рисунок 2).

Рисунок 2. Количество тромбоцитов, подсчитанное оптическим флуоресцентным методом в BC-6800, для образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении в трубках ЭДТА было сопоставимо с количеством тромбоцитов, подсчитанным импедансным методом, для образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении в цитратных трубках. PLT-I (EDTA), количество тромбоцитов, подсчитанное импедансным методом, для образцов в трубках ЭДТА; PLT-O (EDTA), количество тромбоцитов, подсчитанное оптическим флуоресцентным методом, для образцов в трубках ЭДТА; PLT-I (цитрат), количество тромбоцитов, подсчитанное импедансным методом, для образцов в цитратных трубках; псевдотромбоцитопения, индуцированная этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА).

Влияние диссоциации — ЭДТА-индуцированная псевдотромбоцитопения в гематологической системе популярного бренда:
доступно с флуоресцентным красителем?

Оптический флуоресцентный подсчет тромбоцитов доступен как в гематологических анализаторах высокого класса (устройство В), так и в гематологических анализаторах серии Mindray BC-6000. В этом методе используется флуоресцентный краситель для окрашивания нуклеиновых кислот в тромбоцитах, позволяющий распознавать крупные тромбоциты, исключая частицы, не являющиеся ими, такие как осколки эритроцитов, микроэритроциты или лейкоциты.

Рисунок 3. Отсутствие влияния диссоциации оптического флуоресцентного устройства B для подсчета тромбоцитов у пациентов с ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопенией. PLT-I (EDTA), количество тромбоцитов, подсчитанное импедансным методом, для образцов в трубках ЭДТА; PLT-O (EDTA), количество тромбоцитов, подсчитанное оптическим флуоресцентным методом, для образцов в трубках ЭДТА; PLT-I (цитрат), количество тромбоцитов, подсчитанное импедансным методом, для образцов в цитратных трубках; псевдотромбоцитопения, индуцированная этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА).

Для проверки того, зависит ли влияние диссоциации от флуоресцентного окрашивания при подсчете тромбоцитов оптическим флуоресцентным методом, 17 из 23 образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении в ЭДТА-трубках были также протестированы в ретикулоцитарном и импедансном каналах устройства В. Было обнаружено, что нет значительной разницы между подсчетом тромбоцитов в ретикулоцитарном и импедансном канале (Рис. 3). Только один из 17 образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении продемонстрировал диссоциацию более 80 % при средней степени диссоциации 56% для всех 17 образцов ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении (Рис. 3).

Заключение

В заключение автор делает вывод: подсчет тромбоцитов оптическим флуоресцентным методом в гематологическом анализаторе BC-6800 эффективен для коррекции ложного низкого количества тромбоцитов у пациентов с ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопенией, а влияние диссоциации на образцы ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопении не зависит от окрашивания флуоресцентным красителем.

В повседневной работе лабораторий псевдотромбоцитопения является неизбежной проблемой. Технология Mindray SF Cube являет собой эффективный метод PLT-O (основанный на флуоресцентном окрашивании нуклеиновой кислотой на канале RET) для коррекции количества тромбоцитов при псевдослучайном снижении их количества в связи с ЭДТА. Метод PLT-O доступен в автоматическом гематологическом анализаторе серии Mindray BC-6000 и системе цитологического анализа CAL 8000/6000.

Список литературы:

[1] J. Deng, et al. Mindray SF-Cube technology: An effective way for correcting platelet count in individuals with EDTA dependent pseudo thrombocytopenia (Технология Mindray SF-Cube. Эффективный способ коррекции количества тромбоцитов у лиц с ЭДТА-ассоциированной псевдотромбоцитопенией). Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99–101
[2] Y. Bao, et al. Correction of spurious low platelet counts by optical fluorescence platelet counting of BC-6800 hematology analyzer in EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia patients (Коррекция ложного низкого количества тромбоцитов оптическим флуоресцентным подсчетом тромбоцитов с помощью гематологического анализатора BC-6800 у больных с ЭДТА-индуцированной псевдотромбоцитопенией). Transl Cancer Res 2020;9(1):166-172