Новости> Пресс-центр

HemaBook. Глава 6. Технологии Mindray для решения проблемы агрегации тромбоцитов in-vitro.

Mindray 2021-02-08

ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PTCP) возникает под действием антикоагулянтов ЭДТА и является лабораторным феноменом. В процессе EDTA-PTCP происходит агрегация тромбоцитов in-vitro , что может привести к низким значениям тромбоцитов в анализе крови и, как следствие, к неверной постановке диагноза и назначению некорректного лечения пациенту.

В предыдущей главе («Агрегация тромбоцитов») мы рассмотрели два клинических случая, в которых при использовании традиционного метода подсчета тромбоцитов были получены некорректные низкие значения PLT. После повторного анализа проб на гематологическом анализаторе Mindray в режиме RET был получен более достоверный результат - PLT-O, что позволило поставить правильный диагноз.

Теперь давайте рассмотрим, как технологии Mindray решают проблему агрегации тромбоцитов in-vitro.

Каковы критические факторы, способствующие агрегации тромбоцитов in-vitro?

Выделяют три стадии агрегации тромбоцитов: неактивированный тромбоцит, активированный тромбоцит и агрегированный тромбоцит. Наибольшее значение для агрегации тромбоцитов имеет их активация.[1]

Три стадии агрегации тромбоцитов In-Vitro

Таким образом, проблему агрегации тромбоцитов можно решить блокированием процесса их активации. Для выявления механизма активации тромбоцитов были проведены исследования субклеточной структуры и путей передачи сигналов на клеточном уровне. Было обнаружено три основных регуляторных пути активации тромбоцитов: через кальций, триозинкиназу, гликопротеин GPIIb/IIIa.[2]

Кроме того, были проведены исследования соответствующих антагонистов рецепторов для блокирования регуляторного пути и дезагрегации тромбоцитов. В результате были обнаружены несколько видов антагонистов рецепторов, успешно блокирующих агрегацию тромбоцитов.

Фибриноген и другие факторы

Без антагониста рецепторов (два тромбоцита агрегируются)

Блокада рецепторов

С антагонистом рецепторов (агрегация невозможна)

Как показано ниже, добавление антагонистов к пробам с высокой чувствительностью к антагонистам рецепторов до агрегации может предотвратить ее наступление. Добавление антагонистов после агрегации способствует дезагрегации тромбоцитов.

Однако исследование различных видов проб показало, что некоторые пробы остаются не чувствительны к антагонистам. Дело в том, что эти антагонисты работают только с одним регуляторным путем и оказывают ограниченное влияние на два других пути.

В рамках дополнительного исследования для изучения молекулярного механизма и характеристик различных радикальных групп были применены методы молекулярной биологии. Из тысяч возможных химических соединений были выявлены несколько оптимальных веществ, содержащих радикальные группы, с высокой эффективностью блокирующие все три регуляторных пути.

Традиционное решение: антагонисты для одного пути

Решение Mindray: оптимально подобранные вещества для блокирования всех трех регуляторных путей

Для подтверждения влияния этих антагонистов на дезагрегацию тромбоцитов был проведен сравнительный эксперимент с контрольной группой и группой с заблокированными антагонистами. Результаты эксперимента:

Сравнение результатов по дезагрегации

В результате эксперимента мы обнаружили, что антагонисты, содержащие специфичные радикальные группы, оказывают очевидное влияние на дезагрегацию тромбоцитов.

Кроме того, существуют три критических фактора (pH, температура, механическое смешивание), которые усиливают дезагрегацию тромбоцитов. В связи с этим не вызывает сомнений эффект совместного действия этих факторов. Таким образом, благодаря совместному влиянию нескольких факторов агрегированные тромбоциты разъединяются, что позволяет получить точный результат подсчета.

Функция дезагрегации тромбоцитов реализована в режиме RET анализаторов BC-6800/BC-6200/BC-6800Plus/CAL 6000/CAL 8000. Чтобы узнать больше об этих приборах, нажмите здесь.

Список литературы:

[1] The Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIа Complex, David R. Phillips, etc.,Annals of the New York Academy of Science(509), 177-187
[2] Ilya Reviakine. New horizons in platelet research: Understanding and harnessing platelet functional diversity[J]. Clinical Hemorheology and Microcirculation,2015,60:133-152