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HemaBook Capítulo 5: Como a Mindray conta as baixas plaquetas corretamente

Mindray 2021-03-20

Importância clínica

Derivadas dos megacariócitos, as plaquetas (PLT) são produzidas e maturadas na medula óssea. Além da trombose amplamente conhecida e do reparo de feridas, o PLT também desempenha papéis importantes na inflamação, imunidade e biologia do câncer[1]. Os intervalos de referência normais de PLT no sangue periférico variam na faixa de 150-400×109/L. Quando o valor de PLT é inferior a 100×109/L, um problema clínico comum identificado como trombocitopenia (baixo PLT) pode ser o resultado[2].

Existem várias causas de trombocitopenia, incluindo diminuição na produção de PLT, aumento da destruição de PLT, aumento do sequestro e diluição esplênicos[3]. Atualmente, o hemograma completo (CBC) e as análises por esfregaço sanguíneo são métodos diagnósticos essenciais para a avaliação inicial de amostras com trombocitopenia[2]. Portanto, a contagem correta de PLT baixo por um analisador de hematologia automática pode ser uma abordagem prospectiva que reduzirá muito a taxa de esfregaço sanguíneo e economizará tempo trabalhoso no laboratório de diagnóstico, rastreando rapidamente as amostras com trombocitopenia.

No entanto, a contagem correta de PLT baixo não é um processo simples. Como o analisador hematológico automático de última geração da Mindray lida com amostras de PLT baixo?

Solução da Mindray

Tech 1. Coloração fluorescente altamente específica

O corante fluorescente (corante FR) foi especialmente desenvolvido com a capacidade de identificar células-alvo imediatamente. Em seguida, a molécula fluorescente captura o ácido nucléico nas células PLT, evitando interferências de pequenos RBCs, fragmentos de RBC/WBC e outras partículas pequenas. PLT com corante fluorescente específico passa posteriormente pelo detector a laser para medição óptica. A alta especificidade e afinidade do corante fluorescente garante que a ligação dentro das células PLT seja estável o suficiente para que as células atravessem o laser. Isso garante que mesmo pequenas quantidades de PLT possam ser mapeadas e contadas no diagrama de dispersão SF CUBE 3D com precisão.

Tech 2. Detecção óptica de alta resolução

Além disso, o analisador de hematologia de ponta da Mindray combina tecnologia de supressão de luz reflexiva com SiPM (fotomultiplicador de silício), que é altamente sensível a sinais de fluorescência, minimizando simultaneamente o ruído de fundo durante a detecção óptica. Isso melhora muito o limite de detecção de partículas e o limite inferior para pequenas partículas que atingem até 1 um (diâmetro de 2 um é definido como PLT pequeno), garantindo que os resultados da amostra não sejam interferidos por pequenos PLT ou partículas.

Tech 3. Desagregação Plaquetária

A pseudotrombocitopenia é causada pelo acúmulo de plaquetas em um tubo de sangue com EDTA, o que pode levar a uma contagem de PLT falsamente baixa[4]. O departamento de R&D da Mindray conduziu estudos preliminares com foco nos mecanismos de ativação do PLT, que é regulado principalmente pelo canal de cálcio, via da tirosina quinase e GPIIb/IIIa. E então os antagonistas são aplicados em diluente DR para bloquear diretamente os locais de ligação na superfície de PLT, o que minimiza muito a formação de agregados de PLT. Um mecanismo de desagregação PLT mais detalhado será lançado no próximo capítulo do HemaBook.

Figura 4. Contagem automática 8×PLT-O

A Mindray está em processo de pedido de patente (veja a imagem abaixo) para a tecnologia de contagem Auto 8 × PLT-O. Para começar, o valor PLT-I obtido do canal de impedância é primeiro comparado com um valor padrão (50×109/L). Se for inferior ao valor de corte, o analisador pode prolongar automaticamente o tempo de contagem em até oito vezes para coletar mais partículas PLT para análise posterior. Além disso, a tecnologia de contagem automática 8 × PLT-O pode eliminar outros fatores de interferência (por exemplo, RBC/WBC fragmentados) que muitas vezes são contados erroneamente como PLT pelo canal de impedância. Sem amostragem adicional, sem intervenção manual, sem canais e reagentes adicionais necessários - a contagem de 8 × PLT-O é eficiente e eficaz na contagem correta de PLT baixo.

Nº de IPC

Título: MÉTODO E DISPOSITIVO DE DETECÇÃO DE SANGUE

Prepare uma primeira solução de detecção usando uma amostra de sangue
Controle a primeira solução de detecção para passar por uma área de detecção de impedância
Realize a detecção de plaquetas na primeira solução de detecção na área de detecção de impedância com um método de impedância para obter um primeiro resultado de detecção de plaquetas
Prepare uma segunda solução de detecção usando a amostra de sangue quando o primeiro resultado da detecção de plaquetas for inferior a um limite de detecção de plaquetas predefinido
Controle a segunda solução de detecção para passar pela área de detecção de impedância
Realize a detecção de plaquetas na segunda solução de detecção na área de detecção de impedância com um método de impedância para obter um segundo resultado de detecção de plaquetas

Referências:

[1] Thrombocytopenia, Eun-Ju Lee, et al, Prim Care Clin Office Pract 43 (2016) 543–557.
[2] Platelet disorders: an overview, M. Krishnegowda, et al, Blood Coagulation and Fibrinolysis, 2015, Vol 26 No 5.
[3] Thrombocytopenia: an update, K. J. Smock, et al, Int. Jnl. Lab. Hem. 2014, 36, 269–278.
[4] Pseudothrombocytopenia, M Blonska, et al, Wiad Lek. 2001;54(5-6):333-6.