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HemaBook Capítulo 2: ¿Otra opción para solucionar problemas de EDTA-PTCP?

Mindray 2020-11-10

La pseudotrombocitopenia inducida por el ácido etilendiaminotetraacético: (EDTA-PTCP) es un resultado indeseable, un “artefacto”, de laboratorio que puede provocar una evaluación incorrecta y un tratamiento innecesario de los pacientes.

¿Cuál del siguiente método (o métodos) utilizaría para corregir los recuentos de plaquetas en caso de una agregación plaquetaria inducida por EDTA en la trombocitopenia?

Volver a analizar con un frotis de sangre y estimar el recuento de plaquetas

Volver a analizar con la adición de amikacina

Volver a analizar después de calentar a 37 °C

Volver a analizar inmediatamente la dilución sin anticoagulante

Volver a analizar en otro analizador hematológico

Volver a analizar con otros anticoagulantes

Los profesionales de los laboratorios clínicos buscan la precisión y la verdad con el mayor sentido de responsabilidad. Se han realizado recientemente algunos estudios clínicos para explorar las soluciones EDTA-PTCP, y se sugiere que los sistemas de hematología Mindray con tecnología SF Cube serían una opción para ayudar eficazmente a los laboratoristas a identificar los recuentos plaquetarios de manera correcta.

Reporte de un caso clínico

La paciente es una mujer de 32 años con infertilidad. Después de extraer la sangre anticoagulada con EDTA de la paciente, se analizó dentro de los 55 minutos y mostró un recuento de plaquetas bajo(28 × 109/L). El análisis se realizó mediante el método de impedancia (PLT-I) en un sistema de hematología de una marca conocida (analizador A). La agregación plaquetaria se confirmó mediante examen microscópico del frotis, que indicaba pseudotrombocitopenia (PTCP). Poco después, se efectuó un nuevo análisis de esta muestra utilizando el método CDR (PLT-O) en el equipo Mindray BC-6800Plus. Los resultados mostraron un recuento de plaquetas marcadamente más alto con un valor de 180 × 109/L.

Se sospecha que el bajo recuento plaquetario obtenido en el analizador A se debió a PTCP inducido por EDTA. A continuación, se le pidió a la paciente que autorizara una muestra adicional utilizando esta vez un tubo de ensayo de sangre con citrato de sodio. La muestra se analizó treinta minutos después de la extracción. En la Tabla 1 se indican los parámetros plaquetarios resultantes de las muestras de sangre analizadas mediante varios métodos y analizadores de análisis.

Comparación adicional de otras muestras

Bajo la evaluación microscópica del frotis de sangre, la sangre anticoagulada con EDTA mostró agregación plaquetaria mientras que la sangre anticoagulada con citrato de sodio no mostró agregación alguna. Las muestras de sangre se analizaron dentro de las cuatro horas de la extracción, de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Además de esa paciente, se recopilaron y evaluaron los datos de cinco casos adicionales de EDTA-PTCP (Tabla 2).

Al final, el autor concluye: En pacientes con EDTA-PTCP conocida o sospechada, la tecnología Mindray SF-Cube es una forma sencilla y eficaz de determinar el recuento de plaquetas en sangre anticoagulada con EDTA.

Identificación y características de las muestras de EDTA-PTCP

Las muestras que activaron el indicador de “agregación PLT” en el analizador de hematología mostraron una irregularidad dentada típica y una cola en zigzag (Figura 1) en el histograma plaquetario. Además, en la revisión microscópica, no se observa la presencia de satelitismo plaquetario o plaquetas gigantes.

Figura 1: Típico histograma de plaquetas e imágenes microscópicas de muestras de EDTA-PTCP. EDTA-PTCP, pseudo trombocitopenia dependiente del ácido etilendiaminotetraacético.

Recuento plaquetario falsamente bajo mediante recuento óptico (PLT-O) en el BC-6800

Se analizaron 23 muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA (con agregación plaquetaria) en los canales de impedancia (PLT-I [EDTA]) y de reticulocitos del analizador Mindray BC-6800 (PLT-O [EDTA]). Curiosamente, los resultados de PLT-O (EDTA) fueron comparables a los recuentos de plaquetas de las muestras recogidas en tubos de citrato (PLT-I [Citrato]), lo que demuestra que el método PLT-O (EDTA) puede ajustarse con precisión para el problema de agregación plaquetaria causado por EDTA (Figura 2).

Figura 2: Los recuentos de plaquetas mediante fluorescencia óptica con el equipo BC-6800, en muestras de EDTA-PTCP en tubos con EDTA fueron comparables a los recuentos mediante impedancia de muestras de EDTA-PTCP en tubos con citrato. PLT-I (EDTA), recuentos plaquetarios mediante impedancia de muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA; PLT-O (EDTA), recuentos plaquetarios mediante fluorescencia óptica de muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA; PLT-I (citrato), recuentos plaquetarios mediante impedancia de muestras de EDTA-PTCP en tubos de citrato; EDTA-PTCP, pseudotrombocitopenia dependiente del ácido etilendiaminotetraacético.

Efecto de disociación EDTA-PTCP en el analizador hematológico de una conocida marca:
¿Disponible con tinción fluorescente?

El recuento de plaquetas por fluorescencia óptica está disponible tanto en analizadores de hematología de gama alta (analizador B), como en los analizadores de hematología de la serie Mindray BC-6000. En este método, se aplica una tinción fluorescente para teñir los ácidos nucleicos de las plaquetas, lo que permite el reconocimiento de plaquetas grandes y excluye las partículas que no son plaquetas, como eritrocitos fragmentados, erictrocitos microcíticos o restos leucocitarios.

Figura 3: Sin efecto de disociación del recuento plaquetario mediante fluorescencia óptica del analizador B en pacientes con EDTA-PTCP. PLT-I (EDTA), recuentos plaquetarios mediante impedancia de muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA; PLT-O (EDTA), recuentos plaquetarios mediante fluorescencia óptica de muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA; PLT-I (citrato), recuentos plaquetarios mediante impedancia de muestras de EDTA-PTCP en tubos de citrato; EDTA-PTCP, pseudo trombocitopenia dependiente del ácido etilendiaminotetraacético.

Para verificar si el efecto de disociación del recuento de plaquetas de fluorescencia óptica dependía de la tinción con colorante fluorescente, 17 de esas 23 muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA también se probaron en el canal de reticulocitos y el canal de impedancia del analizador B. No se encontró diferencia entre los recuentos plaquetarios del canal de reticulocitos y el canal de impedancia (Figura 3). Solo una de las 17 muestras de EDTA-PTCP mostró una tasa de disociación de más del 80 %, con una tasa de disociación promedio del 56 % entre las 17 muestras de EDTA-PTCP (Figura 3).

Conclusión

El autor concluye, en resumen: El recuento de plaquetas mediante fluorescencia óptica del analizador hematológico BC-6800 es efectiva para la corrección de recuentos plaquetarios fálsamente bajos en pacientes con EDTA-PTCP, y su efecto de disociación en muestras de EDTA-PTCP es independiente de la tinción con colorante fluorescente.

En el ajetreado trabajo diario del laboratorio, la aparición de la pseudotrombocitopenia (PTCP) es un problema inevitable. La tecnología Mindray SF Cube proporciona mediciones de PLT-O (basado en tinción fluorescente de ácido nucleico y efectuadas en el canal RET) para corregir los resultados de PLT cuando hay una pseudorreducción de plaquetas debida a EDTA. PLT-O está disponible en el analizador automático de hematología de la serie BC-6000 de Mindray y en la línea de análisis celular CAL 8000/6000.

Referencias:

[1] J. Deng, et al. Mindray SF-Cube technology: An effective way for correcting platelet count in individuals with EDTA dependent pseudo thrombocytopenia. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99–101
[2] Y. Bao, et al. Correction of spurious low platelet counts by optical fluorescence platelet counting of BC-6800 hematology analyzer in EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia patients. Transl Cancer Res 2020;9(1):166-172